显微镜的分辨力的大小由物镜的分辨力来决定的,而物镜的分辨力又是由它的数值孔径和照明光线的波长决定的.

      光学显微镜分辨力：指能够分辨出两个相距最近的物点的能力。可由下式表示： 两物点的最小分辨距离＝K光学显微镜λ为成像光线的波长，n 为样品周围介质的折射率，α是进入物镜光锥的半角，k为常数-约在 0.61～1.0之间，n·sinα

     物镜的数值孔径（常用N.A.表示），用于测定物镜的分辨力。数值孔径越大，能够分辨出二物点之间的距离则越小，因而分辨力就越强。光学显微镜的最小分辨距离为 0.2微米，如果小于这个距离就不能分辨。

     当用普通的中央照明法（使光线均匀地透过标本的明视照明法）时,显微镜的分辨距离为d=0.61λ/NA 式中d——物镜的分辨距离,单位nm.  λ——照明光线波长,单位 nm.  NA ——物镜的数值孔径 。例如油浸物镜的数值孔径为1.25,可见光波长范围为400—700nm ,取其平均波长550 nm,则d=270 nm,约等于照明光线波长一半.一般地,用可见光照明的显微镜分辨力的极限是0.2μm.